Le professeur introduit dans un récipient un milieu constitué de cinq éléments intervenants pour la culture cellulaire et qui sont :
le milieu de base,
le sérum de veau fœtal (élément nutritif indispensable),
la glutamine (acide aminé),
la pénicilline (pour empêcher d'éventuelles bactéries étrangères à notre culture de proliférer),
des acides aminés non essentiels.
Ces éléments sont introduits à l'aide d'un pipet-aid qui aspire et refoule le liquide dans une pipette graduée. Tous les instruments préalablement stérilisés sont flambés à l'aide du bec Bunsen pour éviter toute contamination extérieure.
Le milieu est ensuite ensemencé dans une boîte à fond plat avec les cellules à cultiver (qui étaient congelées à -80° Celsius). Le mélange est homogénéisé. Le professeur marque ensuite le nom des cellules sur la boîte.
On vérifie au microscope que le milieu a bien été ensemencé. La boîte est placée dans un incubateur à température maîtrisée à 37° Celsius pendant 24 heures au terme desquelles les cellules se seront développées.
